![]() |
![]() ![]() |
![]() |
|
28-Sep-2000
|
![]() |
��� ��� ����, 16(6), ���������-���������� 1999, 580-589
���������� �������
��������� ��� ��������� bcl-2 ��� bax �� ��� ��������
��� ��������� ��� �������� ��� ��������
�. �����������,1 �. ������������,1
�. ��������2
1�����������������
����������, ���� ��������� ����������
2������ �������� ����������� ����������, ���������� ������� ��������
������
�� ����������� bcl-2 ��� �� ������� bax ��� �� ����������
���������� ���� �������� ������� ��������� ���� ��� ������� ��� ���������.
������ ��� ������� ���� � ���������� ��� ������ ��� ��������� bcl-2 ���
bax ��� � ����� ���� �� ��� �������� �� 81 ��������� �������� ��� ��������.
������ ����������: ������� ��������, ��������, bax, bcl-2, �������. |
� �������� � ������������������ ���������� ������� �������� ��������� �� ����������� ��� ��������� ��������������, ��� ��������� ��� ��� ������ �������.1�4 ������ �� �������� ������������ ��� ����������� �����������, ������������������� ��� ��� �������������� ����������.5
���� ���������� ��������� ������ ����������� �������� �������, �� ���������� �������� ��� ������ ����� �� �������� ��������� ��� ���������� �� ������ � �� ��� ��� �������� ���� ��� ��� �������� ���� �����������. ����� ��� �� ������� ���� ����� ������� ������ �������� ����� ������ �����, ������� ��� ���������� ��� �� ������� ����������� ���������� ��� ��������� ����� ���������� ���� �� �������� ��� ��������. ��� ��� ��� ������ ����������� ��� ������� �������� ����� ���� ��� ������������ bcl-2. H bcl-2 ����� ��� �������� 24�26 kd, ��� ����������� ������ ���� ��������� �������� ��� ������������ ��� ������������ ������ �� ��������� ������� �������������� ������������� ��� ������ �������.6 � bcl-2 ������� ��� ��������� ��� ������������� ������, ������������� ��� ��������,7 ��� ��������� ��� ������� ��� ������������, �� ���������� �� ������������ � ��� ��� ��������.8 ��������� ������� ����� ������ ��� � bcl-2 ���������� ��� ������ ��� ������������ c ��� �� �����������,9�10 �� ����� ���������� ��� ��� ������������ ��� ��������/ICE ���������, ��� ����� ����������� ���� ��������.11
����� ������������ ������ ����� ������� ��� bcl-2, �������� ��� �� ����� (bcl-xL, mcl-1 ��� ced-9) ����������� ������ ��� ��������, ��� ���� (bcl-xS, bad, bak ��� bax) ��� ���������. � ������� ��������� ������ ��� ���������� ��� �������� ��� ������ ��� bcl-2 �������� ���� ��� ���� ������� ������������ ����������� ��� ����������� ���������� �������.12,13
� ba� (bcl-2-associated protein X) ����� � ����� �������� ��� ������� �� ��������� �������� �� ��� bcl-2 �� ��� ���������� ������������� ��������.14 � bax ������ �� �������������� �� �� ���� �� ����� (����������) � �� ��� bcl-2 (������������) ��� ���� �������������, �� ��������� ��� �������� ��� ��������.12,15 ��������, ���� � bcl-2 ����� �� ���������, �� ��������� ��� ���������� ��� �� ������� �������������� ��� ��� ��������� ������. ��������, � bcl-2 ���������� ��� ��������, ����� ���������� ������ ��� ���������� ��������������� ��� �������� �������� ��� ���������� ����� ��� bax �� �� ���������� bcl-2/bax ������������.15 � ��������, ��������, ��� bcl-2/bax �������� ��� �������� ��� ������� �� ������ ���� �������� �� �������� �� ��� ���������� ��������.16 ������ ������� ��� ��������� bax ��� ������� ������������ ������ ��������� ��� ��������� ���� ������� ��� �����,17 ��� �������� �� ���������� ��� bax ����������� ��������� ����������, ���� ��������� ��� ������ ��� ���������� ��������.18 �� �������� ���� ����������� ��� � bax ������ �� ������ � �� ���������� ��� ��������� ������ ������� �� ��� ���� ��� �������� ��� ����� ����������, �� ��������� �� ��� �������� � ������������ ��� ����� ����� ��� ����������� bcl-2. ������� ������ ��� bax ������� ��� ���������� ��� ��������19 ��� ������� ����� ���������.20 ������� ��� mRNA ��� ��� ��������� bax ����� ������ ��� �� ����� ���� ���������� ������ ����� ������ �� ����� �� ��� bcl-2, �������� ��� ���������� ��� � bax ���� ��� ����� ����������� ����� ��� ��� �������� ��� ������ ��� bcl-2.21,22 ��� ����������, � bax ���� ���������� ��� �������� ����� ��� �� ���������������� ������� p53, ���� ������������ �������������, �� ������� ��������� ���� ����������� ��� ������� �� ������ ������ ���� ���� ���������� �������� ��� �������� ���� ��� ������ ���� �� ���������� ��� ��������� ����� ��� DNA.23
�� ��� �� ����� ��� ���������� ��������� ��� ��������� �� �� ����������� ����������� ����� ��������������, ����� ������� �� ������������ �� �������� � ������� ����������� �������� �� �� ������ �����������. � ��������� ��� ����������������� �������������������� DNA �� ��� ������� ��� in situ �������� ��� ������� ������������� (ISEL)24,25 ��� � ��������������� ���������� ��� ��������� ��� �������� bcl-2 ��� bax ��������������� ��� ����������� ���������� ��� ������� ��� ���������. ���� ������ �� ��������� ���������� ����������� ���� ��� ��� ���������� ��������� ��� �� ������� ��� ���������. ��� ��������� ��� �������� �� ��������� ���� ��������� ����� ������������, ��������� ��� �� ���������� ������� ����� ������������� ��� ����� ��������� ���������� �����������.
� ������ ��� �������� ������� ���� � �������� ��� ���������� ��� ����������� ��������� ��� ������������ bcl-2 ��� ��� �������� bax ��� � ��������� ���� �� ��� ���������� ��������� ��� ���������� ��� �������� ��� ��������.
����� ��� �������
�����������
����������� 81 ������������ ����������� ���������� ���������, ��� �������������� ��� �� ������ ����� �������� ��� ������������������ �������� ��� ���� ��. ����������. � �������� ��������� ���� ���������� ������ ��� ��������������� ������� ��� ���� ��� ���������������� �������. ��� ��� ��������� ������ ����������� ����������, ���������� �������� ����������� ��� ����������� �����������. �� 60 ����������� ������������ ���������� ������������� 19 �����������, 16 ������������, 10 ����� �����������-������������ ��� 15 ������������ ���������, ��� �� ������ 21 ��������� �������� �� ����������� ���������. ��������, ����������� 3 �� �������������� ��������� ���� �������� ��� ����� ����������. ������� ����� ��� ���� �������� ���� ������ ��� 36 ��������. � ����� ���� ������� ���� 49,93 (����� 14�73) ��� ����� ������ ��� 44,37 (����� 18�65) ��� ���� ��������. ��� ����������� ���������, �� ������� ��� ����������� ��������������� ���������������� ������� ���� ���� ������ �������� ���� ��� ���� ��� �������. ���� ������� �� ����� �����������-������������ ������� ������ ��� �������� ��������� ��������� ����� 1. ��������, ��� �������� �� ������������ ��������� ����� �������� Nelson, ��� �� ��������� ��� ��� ���� ����� ����� ���������� �� ���� Cushing. �� �������� �� �� ����������� ��������� ��������� ������ ����������� ��� ������� ����������.
�� ������� ��� ����� ���� ������ �� 77 �����������. ����� ��� ���� 56 ������������� ������ ���� ��������������, �� ������� ���� ��� 1 cm, ��� �� ��������� 47, ���� ��� �� 21 �� ������������ �����, ���� ��������������. ����������� ��� ��������� �� ������������ ����� ��� ������� �� �����������, ������������ ��� ����� �����������-������������ ��������� ���� ��� �� ����������� �������� ���� ���������� �� 27 �����������. ��� ������, 23 �������� ����� ����� �������������� �����. �� �������� �� ��������� ��� ������������ GH ����� ����� ������� �������������� (����������), ��� ����� ��� ��������� PRL ����� �������������� �� ��������� ��� ���������� (������ �������������).
���������� ������
��� ��� ���������� ������, � ����� ��� �� ������� ��� ���������� ���� ��� ��������, �������������� �� ������� 4% ��������� ��������, ����������� �� �������� ������������� ��������, ����������� �� ������ ��� ��� �������� ���������� ��� ����������� �� ��������. ����� ������ 4�6 �m ������������ �� �������� ������������ �� ����� Vectabond (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ��� ��������� �� ������������-������ ��� �� ��� ���������� ������ PAS.
��������������� ������
��� ��� ��������������� ������, ��������������� � ������� ������� ��� ������������ ��������-��������-������������� (ABC) �� ����� ��������� (Elite Vectastain ABC, Vector). ���������������� ������������ �������� ������ ���� ��� ������� ���������������� ������� � ��� �- ��� �-���������� (SU) ��� ���������������� �������: GH (1:4000), PRL (1:3000), ��������������� (ACTH, 1:2000), �-��������������� ������� (�-TSH, 1:2000), �-������������� ������� (�-FSH, 1:2000), �-������������ ������� (�-LH, 1:2000) ��� �-SU (1:2000). ��� ��� ���������� ��� ���������������, ��� ��� ��������� ��� ������ �������� �� ����� ���������� �� 0,25 mg/mL ������� �������� (Sigma Co, St. Louis, MO, USA) ��� 5 min, �� ����������� ��������.
��� ��� ��������������� ������ ��� �������� ��� ��������� bcl-2 ��� bax, ���������� ������ ���������� ����������� ��� ����� ��� ��� ���������� ��� ���������������, �� ������ ���� �� ������� 0,2% �������� ����� �� PBS (pH 6,0) ��� 1 min �� ����� �������. ��� ��������, ��������������� ����������� �������� ������ ��� ��������� bcl-2 (1:350, ������ 124, DAKO, Copenhagen, Denmark) ��� ������������ �������� ������ ��� ��������� bax (1:1500, Pharmingen, San Diego, CA, USA). �� ������� �������� ��� ��� bcl-2 ���������������� ������������ ���������� ��� ������ � ��-Hodg kin ������� ��� ��� ��� bax ����������� �������� ������� ����� ��� ��������� ��������� ������.
� ��������������� ������� ������������ �� ����: ������������ ��� ����� �� ������������� �� ������� 56 �C ��� 12 ���� ��� ������, ��������� �� ��������� ������������� �������� ��� ��������� �� ���� ������, ����������� ��� ��� PBS (phosphate buffer saline, pH 7,6). ���������� ������������ ��� ������ ��� ���������� ������������� �� ������ �� ������� 3% �2�2 ��� 20 min �� �������� ������, ��������� �� PBS ��� �������� ��� ����������� ����������� ��� ���������������. �� �����, ���� ���������� �� PBS, ���������� ��� 20 min �� ��� ����� � ��� �����, ��� ����������� ��� ����������� ���������� ����������, ��� ���������� ������ ��� 16 ����������� ���� �� �� ����� ��������, ����� 4 �C �� ���� ����������. ����������� ���������� ��������� �� PBS ��� ������ �� �� ����������� �� ������� ������������ �������� ��� 40 min ��� �� �� ������� ������������ ��������-��������-������������� ��� 30 min. ��� ��������, �� ����� ���������� ��� 4 min �� ������� 0,06% ���������� 3,3-����������������� (Sigma) �� PBS ��� 1 �L/mL H2O2, ��� ����� ��� ������ ���� ����� ���� ������ �������� ���������-�����������. �����, ���������� ��������� �� ������������ Harris ��� 2 min, ������� ���������, ��������, ��������� �� Eukitt (O. Kinder Gmbh & Co, Freiburg, Germany) ��� ��������� ��� �����.
����������� �����������
��� ��� ���������������� ������, ���������� ������������� ��������� ������� 0,2�0,3 cm ��� �� ���� ����� ��� ���������� ��������������� �� ������� 2,5% ���������������, �� Sorensen�s buffer ��� 24 ����. ��� ��������, �� ������������� ���������� �� Sorensen�s buffer ��� 40 min, �������������������� �� ����������� ��� ������ �� �������� ���������� ��� 1 ���, ���������� �� Millioning�s buffer ��� 40 min, ������������ �� ��������, ������������� �� ������� ��� ����������� ��� ����������� �� ����� �������� ������� (Epon-Araldite). ��������� ����� ��� ���� ������ ��������� ��������� �� 1% ������ ��� ����������� ��� ����������� �� ������ ����������� �� ���������� ������ ��� ���������������� ������. ���������� ����� ��� ���� ������������ ������ ��������� ��������� �� ����� ��������� ��� ������� �������. � ������ ��� ����������� ����������������� ������ ����� �� �� ����� ������������� ������������ ����� Philips 410LS � JEM-100CX2 (JEOL Ltd, Tokyo, Ja pan). ������������ ��� ��� �������� �������� ����� ���������� �� ����������� ������.26
� ���������������� ������ �������� 5 �����������, 3 ������������, 3 ����� �����������-������������, 5 ������������ ��� 13 �� ����������� ���������. �� ��������� ������������� 8 ����������� ��������� ��� 4 ��������� null ��������, ��� �� ����� 4 �������������.
������ ��� ���������
� ��������������� ���������� �������������������� ��������������� ��� DNA ��� ����������� �������� ���������� �� �� ������� ApopTag (Oncor, Gaithersburg, MD, USA), �� �� ����� ��� �������� in situ �������� ��� ������� ������������� ��� DNA (ISEL). ����� ��������� ������ 5 �m, ���� ����������������, ������������ �� �������� ��� ���������� �� ����������� ����, ���������� �� 60 mg/mL ������� ����������� � (Calbiochem-Novabiochem, La Jolla, CA, USA) �� ����������� �������� ��� 15 min. ���������� ������������ ��� ������ ��� ���������� ������������� �� ������� 3% �2�2 �� �������� ���������� ��� 15 min ��� ������� �� PBS. ��� ��������, �� ����� ���������� �� �� equilibration buffer, ���� ���������� �� �������� ����������, �� ����������� �������� ����� 20 min, ��� ��������� �� ����� 1:3 ������� ������� ������������ �� reaction buffer ����� 37 �C ��� 1 ���. � ��������� ������������ �� ������������� ������� ��������� (stop/wash buffer) ����� 37 �C ��� 30 min. �� ����� ���������� �� PBS ��� ���������� �� ��������� ����-�������������-������������� �� ���� ���������� ��� 30 min, ���� ���������� �� �������� ����������. ����������� ��������� �� PBS ��� �������� ���������� 0,06% ���������� 3,3-����������������� �� PBS ��� 1 �L/mL H2O2, �������������� �� 1 mg/mL ��������� ������� (Sigma). �� ��������� ��������� ����� ����� ���� ������ �������� �� �� DNA. ��� ��������� ��������������� ������� 2% �������� ��� �������� �� ����� ������ �� �������� 10% ���������� ������ ����� (������ pH 4,0) ��� ���������� �������, ������� ��������� �� ��������, �������� �� ������, ��������� ��� ��������� ��� �����. ������������ ���������� ��� �������� ����������� ������ ������� ���������������� �� ������� ��������, ��� ����� ���� ������ �� ������� ��� ������� ������������ �������������� �� reaction buffer, ���������������� �� ��������� ��������.
���������
� ��������������� ������� ��� ��������� bcl-2 ��� bax ���������������� �� �� ����� ���������� Histoscore (HSC), ��� ���������� ��� 0 ��� 12 �������, ��� ������������ ��� �� �������� ��� ������ ��� �������� ������� �������� (0�5%=0, 5�25%=1, 26�50%=2, 51�75%=3 ��� 76�100%= 4) �� �� ����� ������� ��� ������ (1=����, 2=������ ��� 3=������ ���������������). ����� �� ������� ����������� ����� ��������������, �� ���� ������������, �� ������� ������������ ������ �������27 ��� ��-Hodgkin ����������.28
��� ��� �������� ��� ����������� ������ (��) �������������� �������� ���� ����� �� ������ ��������� 400� ��� ����������� ����������� 500 �������. ������� ���������� ���� ������� ��� ���� ������, ������� � ������ ���������� �� �������������� ������ ���������, ���� ��������������� ��� ���������� � ��������������� �����������. ��� ��� ������� ������������ ���� ��� ������������ ��� ��� ����������� ��� ����������� ��������, ������������ � �� ��������� �������� ������� ��� ���� ���������� ��������. � ������� ���� ���� ��� ��������������, �� ������������� ������������, ���� �������� ��� ����� ��������� �������, ���� � �����������������.29 �� ������ ������ �� �������� ��� � �� ��� �������� ������ ������������ ��� ������ ���������, ���� ����� ���� ������ �������� ������� �������� ������� ����� ��������� ������ ��� ����������. �� ��������� ������ ��� ��� ������������ �����������, ��� ��������� �� ����������� ���� ��� ����� ��� � �� ���������� �� � ����� ���� ��� �������� ��� ������� ���� �� ������ ��� ������� ��� ����������.
���������� �������
��� �� ���������� ������� ��� ������������� ��������������� �� Student�s t-test ��� �� Pearson product moment-correlation test. ����� P ���������� ��� 0,05 ���������� ����������� ����������. ��������, ������������ � ����������� ��������� k ��� �� ����� ����� ������� ����� ��� �����������.
������������
�� �� ������ ����������� ������������� �������� ��������� ���������� �������, ������� �������� ��� 1% ��� ���������� ���������. �� ������� ���� ��������� �������� ��� ���������� ����� �� ���������� ��� ����������� ��� ����������������, ������� ��� ��������������� ��� ����������, �� ���������� ��� ��������������� ��� DNA. �� ����������� ������, ���� ������� ��������������� ��� ������� ��� ������������� �������� �� �� ����������� ������� ��� ��� ���������� ����������� �������� (���. 1). �� �� ����������� ����������� �������������� ������� ����������� ����������, ���� ������� ��� ��������� ���������� �� ��������������� ������������, ������������ ��������, ������� ���������� �������� ��� ����������� ������������������ ���������� (���. 2). ����������� ������ ��������������� ��� ���������� ����������� �������� ��� �������� ������������� ��������� ��� ������������ ��������.
� ��������������� ��� bcl-2 ��� bax ����������� ��� ������������� ��� ��������, ���� ��� ����������� ������������, ��� ��� ��� ���������. ��������, � �������� bcl-2 �������� �������������� ������������ � ������������ ������������ �������� (Golgi pattern) (���. 3). �� ��� � ��������������� ���� ����������, � ������ ��� ������� ���������� ���������� (���. 4). � �������� bcl-2 ����������� �� 58% ��� �����, ��� ��������� 32 (53,5%) ����������� ��� 15 (71,5%) �� ����������� ���������. ����������, ��������������� ��� bcl-2 ������� �� 10 (52,5%) �����������, 10 (62,5%) ������������, 5 (50%) ����� �����������-������������ ��� 7 (46,5%) ������������ ���������. � �������� bax ���� ������� ����������������� �������� ��� �� ������� ����������� ���� ��������� ������ ���� ����� ��� ���������� ��������� (���. 5). � �������� bax ����������� �� 65 (80%) �������� ������, ��� ���� ������� 50 (83,5%) ���� ������������ ��� 15 (71,5%) �� ������������ ���, ����������, �� 13 (68,5%) �����������, 15 (94%) ������������, 8 (80%) ����� �����������-������������ ��� 14 (93,5%) ������������ ���������. �� bcl-2 HSC (���. 1) ���� ��������� ��� �� ����������� (4,95) ��� �,�� ��� ����������� (2,76) ��������� �� ����� ����������� ��������� (P=0,02). ��������� ����������� ���������� �������� ��� bcl-2 HSC �������� ������ �� ������������ (4,95) ��� ������������� (1,2) ���������� (P=0,002), ����� ��� ������ ������������� (3,56) ��� ������������� ���������� (P=0,01). ���� ����� �� bax HSC (���. 1), ��� ������� ����������� ��������� ������� ������ ������������ (5,91) ��� �� ������������ (5,58) ����������. � ���������� ������� ��� �������� ��� bax ����� ��������� ������ ������������ ���������� ������ ���������� ��������� bax HSC ��� ������������ (6,98) ��� �,�� ��� ����������� (4,40) ��������� (P=0,05).
��������, 45 ��� �� 81 (55,5%) ��������� ������������� �������� ������������ ������� �� ��� ������� ISEL, ��� �� ����� 39 (65%) ��������� ������������� ��� 6 (28,5%) �� ������������� ������. ����������, ��� ���� ������������� ������, ���������� ������������ �� 14 (73,5%) �����������, 11 (69%) ������������, 5 (50%) ����� �����������-������������ ��� 9 (60%) ������������ ���������. ���� �� ����� ���������� ������������� ����������� ������ ����������� �������� �� ������� � ��������� �������� (���. 6). � ����������� ��������� k ���� �������� ��� �� ������ ��� ��� ����������� ����������� ���� 0,87. ��� ���� ����� �� ������������ ����� ������������� ������ ���������� (���. 1). �� ����������� ��������� ����� ��������� �� (5,7%) ��� �,�� �� �� ������������ ����� (1,92%) ��� ���� � ������� ���� ����������� ��������� (P=0,03). �� ��������� ������� ������� ������� ������������ ��� ������������ ��������� (6,81%), ������������� ��� �� ������������ (5,57%), ����������� (5,51%) ��� ����� �����������-������������ (4,59%) ���������. � �� ���� ����� ������������ ���������� ������� ��������� ��� ��� �� ��� �� ������������ ����� ��� ���������� ����������� ��������� ������� �� �� ������������ ��������� (P=0,02). ��������� �� �� ������� ��� �����, ���������� �� ������������ ��� �������������� (8,7%) ��� �,�� ��� �������������� (5,58%) ��� ������ ��� ������������ �����, ���� �� �������� ����� ��� ���� ����������� ����������. �������� ������ ���������� ��� ��������� GH � ��� PRL �� �������� �� � ����� �������������� ������������ �������� ��� ������ ������ ���������� ��������, �� ��� ������������ ���������� �� ��� ��������� ������� ����� �������� ���, ����������, ��� ������������ (���. 2). �����, ��� ������������� ���������� ������� ���� �� �������������� ������������ ��������� ��� ��� �� ��� ���������� ������������ ��� ��������������� ��� ����� ��� ����������.
������������ ���������� ����� ��� �� �� ��� ������� ��� ��������� bcl-2 �� ����� ���� ������ ����������, ����� ��� �� ������������ ���������, ��� ������� �� ����������� ��������� ����� ��� ������������ ��������� (Pearson product moment correlation, r=-0,59 ��� P=0,02). ��������, � ������ ��� ��������� ��� ������ �� ���������� �� ��� ������� ��� ��������� bax.
��������
��� ������ ������������ ���������� ������������� ������� ������� ��� �������� ��� �������� ���� ������� ��� ���������� ������ �� ������ ���������������� ��������30�37 ��� ��������� ���������.38�41 ��������� �� �� ���������� ��������� ���� �������, � ������� ��� � ������� ��� ��������� ��������� �� ��� �� �������� �������.42,43 In vivo ������������ ������� �� �������� �� ���������� ������������� �������� ����������� ���� ��� �������� �����������, ������� ������ ��� ��������� ���� ��� �������� ��� �����������.38 �������� �������� �������������� ��������� �� ����������� ��� ������� ��� ����������� �������� �� �������� �� ��� ����� ��� ��� ����� ������������ �����. �� ���������� �������� ��� �� ��������� ��� ��������� ���������� ������ �� ������� ��� �������� ��� �� ���������� ��� �������������� ���������� ��� ����������� �������� ��� �������������. �� ��� ���� ������, ��������������� ��� ������� ISEL, ������� ��� � ������������� ������� ��� �������� ��� ����������� ������� ���������� (GH1) ��� ���������30 ��� ��� ������������ ������� ���������� (AtT-20) ��� ��������.31 �� Yonezawa et al40 ������ ��� � ������������� ��� � ����������� (terguride) ������� �� ������������ ��� ��������� �������������� ��� �� ������� ��� �������� ���� ������������ ��� ������� Wistar ���������, ���� ��� ������������ ��������. ���� ���������� ������ ��� �� ������� ��� �������������� SMS 201�995 ���������� ��� ��������� �������������� �� ��� ������� ��� ���������, ��� AtT-20 ���������� ������� ��� ���������� �� �����������������, ����� ����� ��� ��������� ���� G1 � G2 ���� ��� ������.32 ���� �������� ��� � ������ ��� c-myc, ��� �������� � �������������, ����������� �� �������������� ��� ��������� ��� ������� ��� ��������� ����������, ������ �� ������ ������ ���� ���� ������� ��� ���������.33 ��������, �������� ����� ���������� ������� �� ����� ���������� �� ���������� ������ ����������� ����������, ���� � ���������� ��� ����������� ������� C ��������� (hypericin) ��� AtT-20 ��� GH4C1 �������,34 ����� ��� �� ���������� ��� ���������� �������/��������� �������� ��� (okadaic acid) ��� ����������� � (calyculin A) ��� GH3 �������.36,37 �����, �� Guo et al,39 �� ������ ��� ��������� ��������� ��� ������������ �� ������� ���������, ����������� �������� �������� ���� ��� �������� ��� ������������ ��������, ���������� ��� ���������� ��� � ������������������ ��� ���������� ��� ������� ��� �������� ��� �������� ��� ����� in vivo ������ �� ��������� �� ������ ��������� ��������.
�� Green et al,42 �� ��� ������� ISEL, ����������� �������� ��� ��������� �������� ��� �������� ��������� �� �� ������������� ������, ���� ����� ����������� ���������� �������� ��� ���� �������������. ��� ������ ���� ��� ������������ ����� ��� ��������� �� ��� ������� ��� ��������� p53, ����� ��� �� �� ������� � ��� ���� ��� ����������.
�� ������������ ��� ��������, ��� ��� ������������ ������� ���,43 ������� �� �� ��������� ��� ��������� ��� ��������� �������� ��� ��������, �������� ��� � �������� ������ ������ ��� ����������� ���������, �� ����������� ��������� ������� ��� �� �� �����������. ����� ������ ��� ��������� �� �� ����������� ��������� �������� �������, ���� ������� ������ ���������� ���������������.44�46 �� ������������ ����� ��������� �� �� ����������� ��������� ��������� �� ��� ������������ ��� ����������� ��������� ��� ����������� ��� � ������ ��� ��������� ��������� ��� ��� �� ����� ��� ���������� ���������������.
� ���������� ����������� ������� ��� ������������ ��� ������������ ��������� �� �������� ������� �� �������� ���� ����� �������� ��� ����������������� ��� �������������� ���� ������������ ACTH. �� � ������� ���� ����� ������, ��������� �� ���� ������ ����� ������� ��� ������������� ����������45�47 �� ���������� ��������� ����������� ��������������. ������ ��������������� ��� ��������������� ��� ������� ����������� ��������� �������, �� ��� ������������ ���������� �� ��� �����. �����, ���������� �� ������������ �� ��������� ������� ��� ��� ����� ����� �������������� �������� ��� ���������� ��� ������������, ����� ���� ����������� ���������� �������� �� ��� ����� ������� ��� ����� ��������� �� ��������. �� �������� ����� ������ �� ��������� ���� �������� ���������� ������������, ��� ����� ��� ���������� ���� �������� ��� ������ ������ ��� �������� ��� ������������� ������. �������, �� ���������� ����� ��� ���������� ����� ��������� ����������� ���� �� ������� �������� ��� ��������� ��� ��� ������ ��� ��������� ����� ��� �������� ��� ����� ��� ��� ����������� ����� ���� ����.
�� ������� ��� ������� ��� ������� ��� ��������� bcl-2 ��� ��������� �������� ����� ��������� ��� ������ ������������. ���������������, ������� ��� � ������������ bcl-2 ���������� ��� 30% ��� ����������� ����������.48 ���� ������� ������, � ��������� �������� ��� bcl-2 ���� 58%. �� �������� ����� ������� ����������� ��� ����������� ���������� ����������� ��� ���������������, ��� ����������������. �� Woloschak et al,35 ���������� �� ������������ ��� ������ ��� DNA ���� ��� �������� �-������������ �� ����� ����������� �������� �������� (AtT-20), ������ ������� ���� ������ ��� ���������� ������, ���� ������� ��� ��������� ��� ���� ������� ������� ����������� ���������� ��� ���������� �����, ���� � p53, �� c-myc ��� � bcl-2. ����������� �������� ��� ��������������� ��� �tT-20 �������� ���� G1 ��� G2 ������ ��� ������ ��� ��� ��������� ������� ����� ���������� �� ��������. � �������� ���� G1 ���� ��������� �� ������ ������� ��� ��������� p53, ��� � ������� ��� c-myc ����������� �����������. � �������� ���� ���������� ��� ��� ������� ��� �������� bcl-2 ��� ������� ����, ������� ���� ��� ������ ������� ����� �������� ��� bcl-2 ���� ��������� �����. �����, �� Ahlbom et al,41 ���������� ���� ����������� ��� ������������� ���� ��������� ��� ������������ ����������� ��� �������� ����� ��� �������� ��� ��������� ���� ��� �������������, ����������� ��� �� ��������� ���� ����������� ���� ����������� ����������� ��� ����������� ��� ������ ��� ��������� p53 ��� bax ��� �������� ��� ��������� bcl-2.
���� ������� ������, �� ��������� bcl-2 ��� bax ������� �������� �������� ��� ������ ����������� ����� �������� ��� �� �������������� �������������. ��������, ��� ��������� � ��������� ��� bcl-2 ���� ���������� �� �������� �� ���� ��� bax. �� HSC ��� ��������� bcl-2 ��� �� ����������� ��������� ���� ����������� ��������� ��������� ��� ���� ��� ������������ ��� ���������� ���������� ����� �� ��� ��. �� �������� �� ������������ ���������, �������� ���������� ����� ������� �� ���� ��������� ���� ���������� ��� ��������� ��� ������������, ���� �� �������� ���� ����������� ����������. ���� ����� ��� ������� ��� ��������� bax, ��� �������� �������� ������ ��� �������� ����� ���������� ��� ��� ������ ��������� ��� HSC ��� bax ��� ��� ��.
��������������, � �������� ����� ��������� �� ����������� ���������. ��������, � ������� ��� bcl-2 ����� ��������� �� �� ����������� ���������, ��� � bax ���������� �� �������� ��������� �� ����� ���� ������ ��� ����������. �� ������������ ���� �������� ��� �� ������ ��� ������ bcl-2/bax �������� �� ���������� ��� ������� ��� ��������� ��� ��������� ��� �������� ��� ��������. ��������, � ������ ��� ��������� ������ �� �������� ��������� ���� ��������� ��� ��������� ��� ��� ����������� ���������� ��� ������������� ���� ������� ��� �������������� ���������� ��� ��� ���������������� ��� ����������� ����������.
�����������
�� ���������� ��������� ��� ���������� ����������� ���� ���� ��������� �� ����� �������� ��� ��� �������� ������� ��� ���� ������������ �������.
����� ��������������:
� ���������� ��������� ���� �-52/96 ��� �-53/96
� ������ ��������� ������� ��� �������� (�HPP) ��� ������� ����������� ������
(���), Bethesda, MD, USA
������������